Prinsessan Peach är kidnappad av Bowser, och ännu en gång är det Mario som måste komma till hennes undsättning. Den här gången får han hjälp av sina vänner i utmaningen att övervinna de många faror som väntar dem i detta klassiska plattformspel. Multiplayerfunktionen gör det möjligt för upp till fyra personer att samarbeta under spelets gång, eller tävla mot varandra om den bästa placeringen. Figurerna som är tillgängliga att disponera över är Mario, Luigi och Toad. Spelet är tillverkat i samma stil som de klassiska Supermario-spelen, men med vissa speciella funktioner som utnyttjar Wiis rörelsesensor. Du kan till exempel använda dig av kontrollen för att vippa ett bräde och på så vis nå fram till
gömda platser alternativt förstöra för dina motspelare. Spelet introducerar också en propellerkostym som du kan använda dig av genom att skaka på kontrollen. Du kan då flyga till platser utom räckhåll, eller hjälpa andra spelare genom att plocka upp dem och flyga iväg. Det finns också en pingvinkostym som gör att du kan kasta snöbollar och glida på magen och det är också möjligt att att rida på olika Yoshi-figurer och använda hans tunga för att sluka fiender – eller motspelare. Då du fastnat i en bana finns det också en ny hjälpfunktion som visar dig hur du kan ta dig ur problemet. Det är inte längre bara Marios vanliga fiender som skapar problem utan nu måste du även se upp för motspelare!